胎牛血清运用中遇到的常见问题

1、 怎样贮存和冻结血清才不会使产质量量受损?
将血清从冷冻箱取出后，先置于2～8℃冰箱使之融解，然后在室温下使之全融。但必须留意的是，融解过程中必须规矩地摇晃均匀。长时间贮存在2-8℃时，血清中的各种蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纤维蛋白原、玻粘连蛋白等)或许集合而形成沉积或可见的混浊。因而，推荐在-20℃以下贮存血清，并防止反复冻融。
咱们主张血清应保存在-2O℃。若存放于4℃时，请勿超越一个月。若一次无法用完一瓶，主张无菌分装血清至恰当的灭菌容器内，再放回冷冻。

2、血清中包括絮状沉积，它们是什么，怎样处理?
沉积包括纤维蛋白和脂蛋白。这是正常特性，不会影响产品性质。要除掉沉积，离心血清(400g，1-2分钟)或许简略的让其沉积在瓶子底部，将血清当心的转移到另一个无菌瓶里(一般不主张采用过滤的方法除掉沉积，因为沉积会堵塞滤膜而无法过滤)。大多情况悄悄摇摆沉积并加热至37℃就会再溶解。所以，运用产品时要摇摆并加热血清至37℃，沉积会自然消失。

3、实验室怎样选择适合的血清?
国内一致以为HYCLONE的血清是好的，可是依据我在北美的阅历，国外一般以为GIBCO比HYCLONE好，所以并不是价格决定质量，可是总的来说这两种价格普遍偏贵，一般不是太娇气的细胞，国产的就够用了。此外，因为国内HYCLONE，GIBCO并没有生产线，咱们只能从代理商那里买，而代理商又鱼龙混杂，所以买到假货的或许性也很大。所以，我一般会从直销员那里买血清，有的国外生物公司因为刚刚进入我国，度不高，可是其实在国外现已做得很不错了，如Wisent等，他们在国内有办事处，我会从那里拿，血清的质量和HYCLONE平起平坐，但价格相对优惠很多。

4、 怎样防止血清中发生沉积?
按如下操作可防止沉积的发生：
(1)冻结血清时，请随时将之摇晃均匀，使温度及成分均一，减少沉积的发生。
(2) 血清分装冻存时，须规矩摇晃均匀(当心勿形成气泡)，使温度与成分均一。
(3) 勿直接由-20℃直接至37℃冻结，因温度改变太大，简单形成蛋白质凝结而发生沉积。
(4) 勿将血清置于37℃太久，否则血清会变得污浊，同时血清中许多较不稳定的成份也会因而受到破坏，然后影响血清的质量。
(5) 血清的热灭活十分简单形成沉积物的增多，若非必要，可以无须做此过程。
(6) 若必须做血清的热灭活，请遵守56℃，30分钟的准则，并且随时摇晃均匀。温度过高，时间过久或摇晃不均匀，都会形成沉积物的增多。

5、小牛血清和胎牛血清有何区别与留意事项?
来历不同：胎牛血清(Fetal Bovine Serum ,FBS) 是在屠宰怀孕母牛的时候,通过心脏穿刺采血获取的胎牛的血清，新生牛(小牛)血清(Calf serum, CS)采自出生10至14 天的小牛。

组份与份额不同：两者所含的促细胞成长因子、促贴附因子、激素及其他活性物质等组份与份额不同，用途与用法不同：某些细胞必需胎牛血清才能成长，而有些细胞只需小牛血清即可，运用浓度不同，一般在5%-10%，有特殊要求的浓度在20%。
血清保存和运用须留意：血清应保存在-5℃至-20℃，若存放在4℃不行超越一个月。冻结血清时 ，应先将血清至于2-8℃冰箱，并经常摇匀使之溶解，然后至室温放置使之升温，不行将冷冻的血清直接放入37℃水浴或许温箱中，如放在37℃冻结，色彩加深，粘稠度也会添加，血清在冻结和热灭活后，应按用量分装并于-20℃保存，防止反复冻融。