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研域教你怎么降低ELISA试剂盒操作的布景噪音
发布时间： 2020-03-11 点击次数： 1539次在ELISA试剂盒操作中，咱们都认为ELISA试验的原理好像很简单，不外乎固定抗原，添加一抗、二抗和底物，间中夹杂着洗刷和关闭。然而，即使是平淡无奇的洗刷和关闭，假如做得不太好，也有或许毁了整个试验。在试验结束时，咱们是否能获得有意义的信息，这在很大程度上取决于成果的信噪比。布景噪音会影响您对成果的判断。今天我司怎么教你降低ELISA试剂盒操作的布景噪音。
一、洗刷很重要：洗刷步骤看似很无聊，其实很重要，因为假如未结合的资料(如非特异结合的抗体或检测试剂)残留在微孔板中，那么它会添加布景噪音。如有必要，可添加洗刷液中的盐浓度，这会阻挠非特异结合反应。假如布景过高，而您置疑洗刷不够时，可以测验添加洗刷次数。
二、关闭更关键：关闭液的作用是让不相关的蛋白占有微孔板中潜在的结合位点。这就降低了可产生信号的抗体非特异结合的机会。您当然也期望抗体只与目的蛋白结合吧。假如您的布景过高，置疑关闭不充分，那么您可以测验运用更高浓度的关闭液，或适当延伸关闭时间。
三、抗体浓度须优化：咱们通常会follow师兄师姐留下来的操作步骤，但是假如试剂稍有不同，则或许需要优化抗体的量。记住，非特异的抗体结合会添加布景。为了避免这一点，切勿运用过多的一抗或二抗。
四、检测试剂要适量：另一点也很清楚明了：切勿运用过多的检测试剂。假如浓度过高，或者未正确稀释，则会导致高布景。也不要显色过度，如有必要，优化一下何时应加入终止液。
假如您的ELISA试剂盒操作中不幸地遇到了高布景，那么也无需太忧虑，顺次检查ELISA体系中的组分，并排除或许存在的问题。尽心优化，相信很快就会有美丽的成果。
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