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多聚螯合物酶法--EPOS法
发布时间： 2011-11-22 点击次数： 2825次EPOS法（enhanced polymer one-step stainning）
EPOS法（enhanced polymer one-step stainning）是Dako公司近年来推出的一步染色法，它不同于以往的酶标记特异性抗体法，其原理（图4—13）是采用一种具有惰性的多聚化合物（葡聚糖）为骨架，将特异性抗体和HRP结合在一起，形成HRP—多聚化合物—特异性抗体巨大复合物，该复合物内不含第二抗体及亲和素。染色时，只需在组织切片上加入相应的酶标记特异性抗在组织切片上加入相应的酶标记特异性抗体EPOS试剂，孵育30～60min即可完成。勿需再加酶标记第二抗体。EPOS法操作流程如下。
（1）石蜡切片常规脱蜡至水，PBS洗3minX3次。
（2）蛋白酶消化或抗原修复（AR），PBS洗3minX3次。
（3）0．3％过氧过氢（Hz02）处理5min。
（4）蒸馏水洗，置于PBS中洗5min。
（5）加入相应的DakoEPOS／HRP试剂，室温孵育30～60min
（6）PBS洗3minX3次。
（7）0．04％DAB-0．03％Hz02显色8～12min。
（8）水洗，复染，常规树胶封片。
EPOS法只需1次孵育，是目前zui简便的方法。其特异性较高，基本无背景染色，敏感性虽然不如其他二步多聚螯合物方法，但符合一般工作需要。EPOS法不足之处是现有商品化的酶标记特异性抗体的品种不全，目前只有20余种。此外，试剂价格昂贵，尚不能广泛推广应用。
EPOS法（enhanced polymer one-step stainning）
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