免费待测人17-酮类固醇ELISA检测试剂盒

人17-酮类固醇ELISA检测试剂盒　　　　　　　　　　　　

本试剂仅供研究使用  标本：体液

试验原理：
　　　　17-KS试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知17-KS浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将17-KS和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中17-KS的浓度呈比例关系。

自备材料
蒸馏水。
加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
振荡器及磁力搅拌器等。

安全性
避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。
实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。

人17-酮类固醇ELISA检测试剂盒　

操作注意事项
试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。
使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

样品收集、处理及保存方法
血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟，取上清液
保存------如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70 ℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

人17-酮类固醇ELISA检测试剂盒　

操作步骤
使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。
根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1：1稀释后加入50ul于反应孔内。
加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。
甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。
每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。
甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。
每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。避免光照。
取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。
在450nm波长处测定各孔的OD值。

6号标准品以上的结果为非线性的，根据此标准曲线无法得到的结果。

试剂盒性能
1. 灵敏度：zui小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。
2. 特异性：不与人其它细胞因子反应。
3. 重复性：板内、板间变异系数均小于10%。

人17-酮类固醇ELISA检测试剂盒　

结 果 判 断 与 分 析
1、仪器值：于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值

2、以吸光度OD值为纵坐标（Y），相应的17-KS标准品浓度为横坐标（X），做得相应的曲线，样品的17-KS含量可根据其OD值由标准曲线换算出浓度。

3、检测值范围：0-80umol/L

4、敏感度： 0.1 umol/L

ER-α（Estrpgen Receptor alpha） 雌激素受体α抗体 0.1ml
ER-α（Estrpgen Receptor alpha） 雌激素受体α抗体 0.2ml
ER-α/β Estrpgen Receptor α/β 雌激素受体α/β抗体 0.1ml
Phospho-FAK （Tyr407）  磷酸化粘着斑激酶抗体 0.1ml
phospho-FAK （Tyr577）  磷酸化粘着斑激酶抗体 0.1ml
phospho-FAK （Ser732）  磷酸化粘着斑激酶抗体 0.1ml
ER-α/β Estrpgen Receptor α/β 雌激素受体α/β抗体 0.2ml
ER-β （Estrogen receptor-β） 雌激素受体β 抗体 0.2ml
ER-β （Estrogen receptor-β） 雌激素受体β抗体 0.2ml
ESA/EPCAM （Epithelial specific antigen） 上皮特异性抗原抗体 0.1ml
ESA/EPCAM （Epithelial specific antigen） 上皮特异性抗原抗体 0.2ml
ET-1/PPET1（Endothelin-1） 内皮素-1抗体 0.1ml
ET-1/PPET1（Endothelin-1） 内皮素-2抗体 0.2ml
Ets1/ETS-1 Ets转录因子家族ets1抗体 0.2ml
Eukaryotic aspartyl protease（Rice） 天冬氨酸蛋白酶家族蛋白抗体（水稻蛋白的一种） 0.2ml
phospho-Bim（Ser55）  磷酸化细胞死亡调解子抗体 0.1ml
phospho-Bim（Ser69）  磷酸化细胞死亡调解子抗体 0.1ml
Phospho-BLNK（Tyr96）  磷酸化T淋巴细胞连接蛋白抗体 0.1ml
phospho-A Raf （Ser214）  磷酸化A-Raf抗体 0.1ml
Phospho-A Raf （Ser299）  磷酸化A-Raf抗体 0.1ml
EV71（Human enterovirus 71）VP1 肠道病毒71型/手足口病病毒抗体 0.1ml
EV71（Human enterovirus 71）VP1 肠道病毒71型/手足口病病毒抗体 0.2ml
EV71（Human enterovirus 71; VP1）（CT） 肠道病毒71型/手足口病病毒抗体（C端） 0.2ml
EXPB-2（beta-expansin）death inducer-obliterator-2 inducer-obliterator-2 植物延展素-β 0.2ml
Ezrin/Radixin 埃兹蛋白抗体 0.2ml
F1 operon positive regulatory protein（NT） 鼠疫耶尔森氏菌F1荚膜蛋白抗体（N端） 0.2ml
F1 operon positive regulatory protein（CT） 鼠疫耶尔森氏菌F1荚膜蛋白抗体（C端） 0.2ml
phospho-B-Raf （Ser365）  磷酸化B-Raf抗体 0.1ml
phospho-B-Raf （Ser445）  磷酸化B-Raf抗体 0.1ml
phospho-B-Raf （Ser601）  磷酸化B-Raf抗体 0.1ml
Phospho-BAP1 （Ser592）  磷酸化乳腺癌易感基因1抗体（人） 0.1ml
Fabp2 （fatty acid binding protein 2, intestinal） 脂肪酸结合蛋白2抗体 0.2ml
FABP（brain） （Fatty acid-binding protein brain）CT 脑型脂肪酸结合蛋白抗体（C端） 0.2ml
FABPB （Fatty acid-binding protein brain） 脑型脂肪酸结合蛋白抗体 0.2ml
factor V（Vcoagulation factor） 凝血因子5抗体 0.2ml
factor VIII（FVIII） 第八因子相关抗原抗体 0.1ml
Phospho-Btk（Ser180）  磷酸化蛋白酪氨酸激酶ATK抗体 0.1ml
Phospho-Btk（Tyr223）  磷酸化蛋白酪氨酸激酶ATK抗体 0.1ml
Phospho-Troponin I （Ser23/24）  磷酸化钙调节蛋白-1抗体 0.1ml
phospho-CaMK2 alpha （Thr286）  磷酸化钙/钙调素依赖蛋白激酶2α抗体 0.1ml
Phospho-Cas （Tyr165）  磷酸化细胞凋亡敏感性基因 0.1ml
factor VIII（FVIII） 第八因子相关抗原抗体 0.2ml
factor ⅩⅢ（coagulation factor ⅩⅢ） 凝血因子13抗体 0.2ml
FADD/DAXX （Fas-associated protein with death domain） Fas死亡结构域相关蛋白 0.2ml
phospho-FADD（pSer194） 抗磷酸化Fas死亡结构域相关蛋白抗体 0.2ml
FAK（Focal adhesin kinase） 粘着斑激酶抗体 0.1ml
Phospho-Caspase-9 （Try153）  磷酸化半胱氨酸蛋白酶9抗体 0.1ml
Phospho-Caveolin-1 （Tyr14）  磷酸化细胞质膜微囊蛋白-1抗体 0.1ml
phospho-Beta-catenin（Tyr142）  磷酸化β 连环素蛋白抗体 0.1ml
Phospho-Beta-Catenin （Ser33/37）  磷酸化β 连环素蛋白抗体 0.1ml
Phospho-Beta-Catenin （Ser45）  磷酸化β 连环素蛋白抗体 0.1ml
FAK（Focal adhesin kinase） 粘着斑激酶抗体 0.2ml
phospho-FAK（pTyr577） 抗磷酸化粘着斑激酶抗体 0.2ml
FAF1（Fas associated factor 1） Fas相关1因子抗体 0.2ml
FANCF（Fanconi Anemia Complementation Group F） 范可尼贫血相关蛋白F抗体 0.2ml
FAM3B/PANDER（PANcreatic DERived factor） 胰腺衍生因子抗体 0.2ml
phospho-CBL2（Tyr731）  磷酸化原癌蛋白CBL2抗体 0.1ml