elisa试剂盒的实验操作注意事项

elisa试剂盒实验操作注意事项:
1、   试剂价格较高，实验前有任何疑问及实验中有任何问题请及时与本公司取得，避免造成损失！

2、   试剂盒应在2～8℃冰箱内储存，且注意不可冻结。

3、   请勿使用过期的试剂盒或其中的组件或混用不同批次试剂盒的试剂，以免降低灵敏度。

4、   0标准品的A450nm<0.6时，表示试剂可能变质，请勿使用；显色剂变蓝，表明已变质，请勿使用。

5、   将试剂盒内试剂稀释或者改变其浓度将会影响检测结果。

6、   当从冰箱中取出试剂盒进行检测时，应将试剂盒于室温（20～26℃）下放置半小时以上，使其温度回升至室温。

7、   试剂盒内的各种试剂在使用前应充分摇匀（酶标物溶液轻摇即可，不可起泡），以确保试剂浓度的均一性。

8、   微孔条按需使用，将剩余的微孔条立即放入包装袋中，于2～8℃干燥密封的条件下保存。

9、   向酶标板微孔中加入试剂或样品时，为确保操作的一致性，加液时枪头应垂直悬空至板孔正中央，保证样液应加至孔中央，动作迅速，避免枪头接触孔壁，避免样液溅到孔壁或溅出微孔，造成不必要的非特异性吸附或损失。特别是加入共同试剂（如酶标抗体），由于可能会用到排枪，该操作尤为重要。

10、             加样完毕后，应将酶标板至于振荡器或用移液器枪头轻敲，使孔中液体充分混匀，但需注意的是切勿不可将孔中的液体摇出，影响检测结果。

11、             样品前处理注意事项：尿样，若样品中出现浑浊或沉淀，可将其至于离心机中适当离心，取其上清液作检测样品;肝样或肉样，请参照说明书提供的方法进行提取。于水浴锅中提取时，水浴应始终保持沸腾，若由于其他原因达不到所需温度（但不得低于85℃），可适当延长提取时间，直至组织样品明显变色为止（由红色变黄褐色或白色），且趁热进行离心，离心力保持在4000g/r以上以保证上清液澄清。

12、             如果选择室温条件下反应，在整个检测过程中，应保持温度在20～26℃之间，同时为了避免反应过程外界环境因素的影响，酶标板上应贴上一层薄膜或置于封闭环境中避光反应；如果选择37℃条件下反应，建议在水浴锅中进行，且酶标板上也应贴上一层薄膜，防止试剂的挥发。

13、             洗板时如果选择蒸馏水作为洗液，要保证洗涤用水的pH范围在6～8之间；如果水质较差请选择试剂盒配备的浓缩洗液稀释后作为洗液。为了确保洗涤的一致性，建议洗涤时采用专门配置的洗板机，反复洗涤6次，每次洗涤的体积以溢满微孔为宜（约300μL）。如用其他方法洗板时，请注意操作方法，避免清洗不*或产生交叉污染。

14、             在加入酶底物液进行显色时，可向板孔中先加50μL的底物缓冲液，然后再加入50μL的底物液（注意加完后混匀液体），或者将底物缓冲液和底物液充分混匀后（混匀容器应洁净，现配现用），再向每孔中加入100μL的混合液。

15、             终止液含有1mol/L硫酸溶液，避免皮肤直接接触，操作时要注意安全。

16、             推荐使用高质量的吸头及移液器，且吸头不可反复使用（难以清洗干净）。